+7 (727) 250 00 11
+7 (776) 250 05 58

ISSN 2303-9949

Современные технологии решения проблемы интерференции различных факторов при проведении гематологических исследований

Автор: Е. В. Фомичева
Место работы: Ведущий специалист по продукции ТОО «НПФ «Медилэнд», Алматы (Казахстан)

При проведении гематологических исследований часто возникает проблема интерференции различных факторов – таких, как холодная агглютинация, агрегация тромбоцитов, гемолиз и других, которые приводят к получению недостоверных результатов. Использование современных технологий позволяет снизить уровень интерференции и повысить качество предоставляемых лабораторией результатов.
Гематологическая лаборатория ежедневно сталкивается с проблемами, связанными с интерференцией ряда факторов – таких, как холодная агглютинация, криоглобулины, агрегация тромбоцитов, гемолиз, наличие фрагментов эритроцитов и рядом других. Перечисленные факторы приводят к сложностям в измерении образца крови, и, как следствие, к получению недостоверных результатов. Перед современной лабораторией стоит непростая задача – предоставить в короткий срок достоверные, информативные данные.

Современные автоматические гематологические анализаторы должны иметь возможность проводить измерение таким образом, чтобы свести к минимуму интерференцию различных факторов на конечный результат, а также использовать технологию, позволяющую снизить проведение повторных тестов ручным методом. Наличие такой технологии позволит устранить ошибки, неизбежно возникающие при этом. 

Большинство существующих гематологических анализаторов проводят измерение тромбоцитов и эритроцитов импедансным методом, что не устраняет вышеперечисленные факторы интерференции. 

При этом если результаты недостоверны, возникает реальная угроза для пациента, особенно, если он находится в тяжелом состоянии или страдает тяжелым заболеванием. 

Решение данной проблемы можно показать на примере анализаторов серии XN.
Особого внимания требуют результаты, связанные с измерением тромбоцитов. Ряд причин, например, фрагменты эритроцитов, гигантские тромбоциты, агрегаты тромбоцитов приводят к недостоверным результатам анализа тромбоцитов. В этом случае в результатах, предоставляемых анализатором, будет указано ложно нормальное, либо ложно повышенное количество тромбоцитов, при наличии в действительности тромбоцитопении. Как следствие, возможно проведение неадекватной терапии. Для проверки результатов необходимо провести измерения альтернативным методом или приготовить мазок (рис.1)

Современные технологии решения проблемы интерференции  различных факторов при проведении гематологических исследований

При рассмотрении вопросов, связанных с диагностикой анемии, можно выделить такие ключевые параметры, как HGB, MCV, MCHC, на основании которых традиционно проводят оценку данного заболевания. Указанные параметры дают предварительный результат, опираясь на который, можно сделать вывод о необходимости проведения более глубоких исследований, в том числе ретикулоцитов. 

Однако, уже на стадии проведения традиционных исследований CBC ряд факторов может вносить негативное влияние на получение достоверных результатов. В случае холодной агглютинации при измерении импедансным методом без предварительного нагрева образца результаты RBC, HGB недостоверны. Гемолиз образца ведет к ложно повышенному HGB. Данные проблемы можно решить, проведя измерения в RET-канале (Рис 2,3). 
Исследование ретикулоцитов и содержание в них гемоглобина — важный фактор при диагностике и лечении анемии.

Современные технологии решения проблемы интерференции  различных факторов при проведении гематологических исследований

Измерения, проводимые в RET-канале в анализаторах серии XN, позволяют также получить данные о разных фракциях ретикулоцитов (Рис. 4.), что отражает напрямую не только процесс эритропоэза, но и гемоглобиновый эквивалент в ретикулоцитах (RET-He). RET-He предоставляет результат в зависимости от соотношения объема ретикулоцита концентрация гемоглобина, информируя о синтезе HGB в ретикулоцитах. Данный параметр очень важен для мониторинга терапии, проводимой при анемии, так как действие терапии можно проследить уже к концу первой недели, а не в течение 3-4 месяцев, как при стандартном мониторинге. Данный эффект связан с особенностями эритропоэза и разницей во времени обновления ретикулоцитов (3-4 дня) и эритроцитов (в среднем 120 дней). 

Современные технологии решения проблемы интерференции  различных факторов при проведении гематологических исследований

Интерференция, вызванная холодной агглютинацией эритроцитов, распространяется также на подсчет лейкоцитов, вызывая ложный лейкоцитоз. Существует и обратная интерференция. При экстремальном лейкоцитозе, более 100х103кл /мкл, наблюдается абнормальное распределение эритроцитов и, как следствие, ложно пониженный HGB.

В анализаторах серии XN решена проблема интерференции нормобластов на результат измерения лейкоцитов. Кроме того, данный параметр автоматически измеряется при проведении CBC-исследования и является диагностическим, что имеет большую клиническую значимость в педиатрии и онкологии.
Диагностическим и прогностическим параметром в анализаторах серии XN является также наличие незрелых гранулоцитов (про-, мета-, миелоцитов). При этом клинически данный параметр является более значимым, нежели «левый сдвиг». При назначении DIFF исследования, анализаторы серии XN обязательно проводят измерения данной клеточной популяции.

Работа анализаторов серии XN основана на принципе флуоресцентной проточной цитомерии, который позволяет получить четкое разделение клеточных популяций, основываясь на их размере, внутриклеточной структуре, и главное, содержании нуклеиновых кислот, что является отражением принадлежности клетки к той или иной субпопуляции и ее функционального состояния. 

Следует отметить, что в анализаторах серии XN реализована уникальная технология Reflex-тестирования. Этот принцип позволяет автоматически проводить повторное измерение патологического образца, например, при наличии тромбоцитопении или пониженного гемоглобина, другим методом без участия врача-лаборанта. 

Принцип Reflex-тестирования также применим к образцам с очень низким содержанием лейкоцитов, для получения достоверных результатов измерения нейтрофилов.

Концепция Reflex-тестирования реализована и в возможности мониторирования положительных по тем или иным причинам образцов с помощью специальной валидационной системы Extended IPU, разработанной компанией Sysmex. При наличии Лабораторной информационной системы (ЛИС) имеется возможность подключения к Extended IPU анализаторов мочи UF-1000i и UX-2000i, автоматической станции приготовления и окраски гематологических мазков SP-10, автоматической системы преклассификации клеток DM-96 либо DI-60 и других анализаторов компании Sysmex.

Таким образом, на сегодняшний день в области гематологических исследований представлены технологии, позволяющие решить каждодневные проблемы гематологической лаборатории и гарантировать качественный, достоверный и точный результат. Учитывая, что стандартизация проводимых исследований, уменьшение количества анализов, проводимых ручным методом, устранение в ходе измерения различных факторов, оказывающих влияние на предоставляемые данные, позволяет значительно повысить качество результатов. Внедрение таких технологий в рамках развития лабораторной службы Республики Казахстан представляется весьма перспективным.

Статья основана на материалах производителя,
компании Sysmex Corporation, Япония