Т.К. Кудайбергенов, Ж.А. Утешева, Л.С. Дзоз, Н.В.Кравцова
Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии
Казахстан, Алматы
Аннотация
Целью исследования явилось изучение иммунно-гормональных и биохимических параметров в пуповинной крови новорожденных от здоровых рожениц с физиологической беременностью. Методом прямой мембранной иммунофлюоресценции на проточном цитометре BD Facs Calibur изучено содержание и функциональные свойства в пуповинной крови СД3+, СД4+ СД8+, СД16+, СД19+, СД25+, СД56+, HLA-DR+ лимфоцитов с использованием коммерческих наборов реагентов, меченных FITS, а так же меченые РЕ (СД25, СД95) BD Biosciences (США). Изучение содержания дегидроэпиандростерона – ДГЭАС и тиреотропного гормона проводилось хемилюминесцентным методом на автоматическом анализаторе «Cobas е411» (Roche- Hitachi). Исследование биохимических показателей крови (аланин аминотрансфераза (АЛТ), аспартат аминотрансфераза (АСТ), щелочная фосфатаза (ЩФ), общий белок, билирубин, креатинин, мочевина, глюкоза) проводилось на автоматическом биохимическом анализаторе «Cobas Integra» (Roche-Hitachi) готовыми наборами реагентов.
Результатом проведенного исследования явилась разработка нормативных показателей иммунно-гормонального и биохимического профилей в пуповинной крови новорожденных от здоровых рожениц с физиологически протекавшей беременностью.
При исследовании были установлены количественные и функциональные параметры иммунной системы, гормонов и биохимических показателей пуповинной крови здоровых новорожденных.
Ключевые слова: пуповинная кровь, новорожденные, субпопуляционный состав лимфоцитов, гормоны, биохимические показатели.
звестно, что в благоприятном исходе беременности важную роль играют локальные параметры иммунной и гормональной систем, в частности факторы иммунитета, участвующие в процессе взаимодействия материнских клеток и трофобласта в децидуальной оболочке [1]. Состояние иммунной системы является одним из важных критериев полноценности функциональных гомеостатических механизмов беременной, обеспечивающих динамическое равновесие в системе мать-плацента-плод [2]. Беременность характеризуется появлением плодовых антигенов, которые определяют тот или иной тип иммунного ответа, популяционный состав иммунокомпетентных клеток и их функциональную активность. На каждом этапе гестации имеется определенный количественный уровень популяций и субпопуляций лимфоцитов, отражающий последовательную системную адаптацию к выраженности антигенной нагрузки [3].
В связи с этим определенный интерес представляет исследование иммуно-гормональных и биохимических параметров локально в пуповинной крови.
Целью исследования являлось изучение иммунно-гормональных и биохимических параметров в пуповинной крови новорожденных от здоровых рожениц с физиологической беременностью.
Материал и методы
Исследования проведены у 30 новорожденных, родившихся при естественных родах с оценкой по шкале Апгар 8-9 баллов. Материалом исследования служила пуповинная кровь новорожденных.
Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови женщин, рожениц, родильниц и пуповинной крови выявляли по общелимфоцитарному гейту СД45+ методом прямой мембранной иммунофлюоресценции на проточном цитометре BD Facs Calibur с применением панели моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов: к СД3+ — маркеру зрелых Т-лимфоцитов, к СД3+,СД4+ — маркеру хелперно-индукторных Т-клеток, к СД3+, СД8+- маркеру супрессорно-цитотоксических Т-лимфоцитов, к СД3+, СД16+, и к СД3+, СД56+ — маркеру натуральных киллерных клеток СД16+ и СД56+ фенотипов, к СД19+ — маркеру В-лимфоцитов, к СД3+, HLA-DR+ — маркеру активированных Т-лимфоцитов, к СД3+, СД25+ — маркеру £-цепи ИЛ-2, к СД3+, СД95+ — маркеру апоптоза. Определяли ИРИ по соотношению СД4+/СД8+ клеток, а также индекс апоптоза по СД95+/СД25+. Локализацию активационных маркеров СД25+ и СД95+ на клетках осуществляли методом двойного фенотипирования. Использовали коммерческие наборы реагентов, меченные FITS (CД3, CД4, CД8, CД16, CД19, СД25, СД95, HLA-DR) , а также меченые РЕ (СД25, СД95) BD Biosciences (США).
Изучение содержания гормонов дегидроэпиандростерона – ДГЭАС и тиреотропного гормона — ТТГ) проводилось хемилюминесцентным
Исследование биохимических показателей крови (аланин аминотрансфераза (АЛТ), аспартат аминотрансфераза (АСТ), щелочная фосфатаза (ЩФ), общий белок, билирубин, креатинин, мочевина, глюкоза) проводилось на автоматическом биохимическом анализаторе «Cobas Integra» (Roche-Hitachi) готовыми наборами реагентов.
Для обработки результатов биохимических исследований использовался пакеты программ SuperCalc ™, фирмы Computer Associates International, Inc. И Statgraphics, фирмы Statistical Graphics Corporation на IBM РС-386. Достоверность различия признаков определялась по коэффициенту Стьюдента. В обработке учитывались только достоверно значимые различия (р<0,05-р<0,001).
Результаты исследования
В таблице 1 приведены нормативные показатели субпопуляций лимфоцитов пуповинной крови новорожденных.
В таблице 2 приведены контрольные показатели локализации активационных маркеров СД25+ и СД95+ на СД4+, СД8+, СД16+ лимфоцитах пуповинной крови новорожденных.
Таким образом, исследование количества и функциональных свойств лимфоцитов пуповинной крови здоровых новорожденных определило нормативные показатели фенотипа лимфоцитов, их функциональных свойств, которые могут рассматриваться в качестве контроля.
В ходе исследования была проведена оценка гормонального статуса новорожденных, родившихся при естественных родах от здоровых матерей с физиологической беременностью (таблица 3). В виду нецелесообразности определения в пуповинной крови стероидных гормонов, плацентарного фактора роста и гормонов, ассоциированных с беременностью, в пуповинной крови было исследовано содержание ДГЭАС и ТТГ.
Проведенные исследования не выявили достоверных различий в содержании ДГЭАС и ТТГ в пуповинной крови новорожденных контрольной группы.
Были установлены характер и последовательность изменений биохимических показателей в пуповинной крови новорожденных контрольной группы. Результаты исследований представлены в таблицах 4.
Концентрация исследуемых показателей в пуповинной крови новорожденных контрольной группы также находилась в пределах нормы, но данные были ниже средних показателей, по данным литературы. За исключением уровня мочевины, который был не только почти в два раза ниже средне-нормативного показателя, но и на 30% меньше нижней границы нормы.
Выводы
Полученные результаты в пуповинной крови новорожденных определили количественные и функциональные показатели фенотипа лимфоцитов лимфоцитов, которые могут рассматриваться в качестве контрольных.
Оценка гормонального статуса новорожденных, родившихся при естественных родах от здоровых рожениц с физиологически протекавшей беременностью не выявила достоверных различий в содержании ДГЭАС и ТТГ в пуповинной крови новорожденных контрольной группы с общепринятыми нормативными показателями.
Содержание биохимических показателей в пуповинной крови новорожденных контрольной группы также укладывается в нормативные показатели, за исключением уровня мочевины, который был ниже средне-нормативного показателя на 30%, что подтверждает необходимость разработки персональных нормативных показателей для каждой лаборатории с учетом особенностей контингента, региона и других условий окружающей среды.
Список литературы:
1. Павлов О.В., Сельков С.А. Иммунология репродукции: старые догмы и представления.- Журнал акушерства и женских болезней. – СПб, -2004, — № 3, — С. 89-97.
2. Siristatidis C., Salamalekis E., Kassanos D., et al. Alteration in doppler velocimetry indices of the umbilical artery during fetal hypoxia in labor in relation to cardiotocography and fetal pulse oxymetry findings.- Arch. Gynecol. Obstet. 2005. – Vol. 19. – P. 159–162.
3. Тетруашвили Н.К. Роль иммунных взаимодействий на ранних этапах физиологической беременности и при привычном выкидыше. Иммунология. — 2008,– Т. 29, № 2, — С. 124–129.
References
1. Pavlov O.V. , Sel’kov S.A. Immunologiya reproduktsii : staryye dogmy i predstavleniya.- Zhurnal akusherstva i zhenskikh bolezney . — SPb, -2004 , — № 3 , — S. 89-97.
2. Siristatidis C., Salamalekis E., Kassanos D., et al. Alteration in doppler velocimetry indices of the umbilical artery during fetal hypoxia in labor in relation to cardiotocography and fetal pulse oxymetry findings.- Arch. Gynecol. Obstet. 2005. – Vol. 19. – P. 159–162.
3. Tetruashvili N.K. Rol’ immunnykh vzaimodeystviy na rannikh etapakh fiziologicheskoy beremennosti i pri privychnom vykidyshe . Immunologiya . — 2008 , — T. 29 , № 2 , — S. 124-129.
ТҮЙІНДЕМЕ
Физиологиялық жүктілікпен дені сау босанатын әйелдерден туылған жаңа туған нәрестелердің кіндік қанындағы гомеостаз көрсеткіштері
Е.Ж. Бекмухамбетов, А.А. Мамырбаев
Марат Оспанов атындағы Батыс-Қазақстан мемлекеттік медицина университеті,
Қазақстан, Ақтөбе
Т.К. Құдайбергенов, Ж.А. Утешева, Л.С. Дзоз, Н.В. Кравцова
Акушерлік, гинекология және перинатология ғылыми Орталығы,
Қазақстан, Алматы қаласы.
Жаңа туған нәрестелердің кіндік қанынан алынған нәтижелер бақылау ретінде қаралуға мүмкін лимфоциттер фенотипінің сандық және функционалдық көрсеткіштерін анықтады.
Физиологиялық ағымдағы жүктілікпен дені сау босанатын әйелдерден табиғи босану кезінде туылған нәрестелердің гормоналдық статусын бағалау – көпшілік мақұлдаған нормативтік көрсеткіштері бар бақылау тобындағы жаңа туған нәрестелердің кіндік қанында ДГЭАС және ТТГ құрамында нақты айырмашылықтарды айқындамады.
Бақылау тобындағы жаңа туған нәрестелердің кіндік қанында биохимиялық көрсеткіштердің құрамы сондай-ақ нормативтік көрсеткіштерге жатқызылады, орта-нормативтік көрсеткіштен 30%-ға төмен болған мочевинаның деңгейін санамағанда, бұл әр зертханаға арнайы нормативтік көрсеткіштерді әзірлеу қажет екендігін расстайды.
Түйін сөздер: кіндік қан, жаңа туған нәресте, лимфоциттердің субпопуляциялық құрамы, гормондар, биоклиникалық көрсеткіштер.
Summary
Homeostasis indicators in the umbilical cord blood of newborns from healthy women with physiological pregnancy
E.Zh. Bekmukhambetov, A.A. Mamyrbayev
West-Kazakhstan State Medical University named after Marat Ospanov
Kazakhstan, Aktobe
T.K. Kudaibergenov, Zh.A. Utesheva, L.S. Dzoz, N.V. Kravtsova,
Scientific Center of Obstetrics, Gynecology and Perinatology
Kazakhstan, Almaty
The results obtained in the newborns cord blood defined quantitative and functional indices of lymphocyte phenotype, which may be considered as controls.
Evaluation of the hormonal status of infants born from a natural delivery of healthy women with normal pregnancy revealed no significant differences in the content of DHEAS and TSH in the umbilical cord blood of newborns in the control group with the generally accepted standard indicators.
The content of biochemical parameters in newborns cord blood of control group also fits into standard indicators, except the urea level, which was 30% less than the average standard ratio, what confirms the necessary of personal normative values development for each laboratory allowing for the contingent, region and other environment conditions.
Keywords: umbilical cord blood, newborns, subpopulations of lymphocytes, hormones, biochemical parameters.
Отправить рукопись