Аннотация
В статье рассматриваются вопросы оценки безопасности донорской роговицы. Проведен сравнительный анализ данных обнаружения антител С иммунохроматографическим экспресс- тестом и методами ИФА, ПЦР в крови доноров для пересадки роговицы.
Ключевые слова: экспресс-тест, пересадка роговицы.
На сегодняшний день в КазНИИГБ выполняется порядка 100 трансплантаций роговицы в год. При этом потребность в данных операциях увеличивается ежегодно. Это по подсчетам составляет около 300 в год [1]. Для предотвращения трансмиссионного инфицирования реципиента кровь донора проверяют на наличие ВИЧ инфекции.
Существуют Международные регламенты для обеспечения защиты здоровья реципиентов от ВИЧ инфицированных:
1. Директива Европейского Парламента и Совета №2004/23/ЕС от 31 марта 2004 года «Об установлении стандартов качества и безопасности для донорства, получения, контроля, обработки, консервации, хранения и распределения человеческих тканей и клеток»;
2. Директива Европейского Парламента и Совета №2010/53/ЕС от 7 июля 2010 года «О стандартах качества и безопасности человеческих органов, предназначенных для трансплантации».
Они направлены на исключение заражения реципиента донорским материалом, в том числе, и от группы высокого риска ВИЧ инфицированных.[2].
В Республике Казахстан диагностика трупного материала производится согласно Приказу Министра здравоохранения Республики Казахстан от 30 октября 2009 года № 623, где производится исследование крови на ВИЧ инфекцию.
В лаборатории подготовки донорской ткани для трансплантации в КазНИИГБ для оценки безопасности донорского материала мы используем иммунохроматографические экспресс-тесты фирмы «Human», Германия.
Согласно протоколам фирмы, достоверность экспресс теста для живых доноров приближается к 100%.
Для подтверждения результатов экспресс диагностики кровь донора направляется в организации, осуществляющие деятельность в сфере службы крови на исследование методом иммуноферментного анализа и (или) ПЦР на ВИЧ инфекцию.
Данных по экспресс диагностике трупной крови в литературе нет.
Цель
Провести анализ экспресс тестирования трупной крови доноров роговицы с данными с методами ИФА, ПЦР.
Материалы и методы
Проведен сравнительный анализ инфицированности трупной крови 382 доноров методами экспресс-анализа и традиционными за 2010 -2014 годы, по данным лабораторий подготовки донорской ткани для трансплантации роговицы Казахского научно-исследовательского института глазных болезней и Государственных лабораторий РК.
Экспресс исследования проводились тестами фирмы «Human», Германия, предназначеных для быстрого качественного определения антител классов IgG, IgA и IgM в сыворотке, плазме и цельной крови человека с целью специфического диагностирования только для in vitro диагностики.
Тест основан на иммунохроматографическом принципе и использует современную «сэндвич»-технологию с применением двух видов комплексов рекомбинантных антигенов (тест 3-го поколения).
Нами проведен сравнительный анализ инфицированности трупной крови 382 доноров методами экспресс-анализа и традиционными (ИФА, ПЦР) за 2010 -2014 годы. Использованы данные лаборатории подготовки донорской ткани для трансплантации Казахского научно-исследовательского института глазных болезней.
Интерпретация результатов
— Отрицательный результат (Рис. 1). Результат считается отрицательным при наличии только одной (контрольной) красно-фиолетовой полосы (С) в верхней части зоны результатов, показывающей, что тестовое устройство работает корректно и анализ проведен правильно.
— Положительный результат (Рис. 2 и 3) Результат считается положительным, указывающим на наличие в образце антител к ВИЧ инфекции, при наличии двух красно-фиолетовых полос в зоне результатов тестового устройства. Появление даже слабо окрашенной второй линии указывает на положительный результат теста (Рис. 3). Разница в интенсивности тестовой (Т) и контрольной (С) полос возможна, однако не имеет значения для интерпретации результатов.
— Неправильный результат (Рис. 4) Отсутствие контрольной окрашенной полосы (С) в зоне результатов, даже при наличии тестовой полосы, свидетельствует о неправильном выполнении теста или непригодности тестового устройства. В этом случае следует провести повторное исследование с другим тестовым устройством.
Результаты и обсуждение
За 5 лет все экспресс тесты трупной крови доноров дали отрицательный результат. Однако при исследовании методами ИФА, ЦПР на ВИЧ, сифилис, гепатиты В и С были получены следующие положительные результаты:
Гепатит «С» — 22 случая (5,8%),
ВИЧ – 3 (0,8%),Сифилис – 25 (6,5%),
Сомнительные – 8 (2%).
За 5 лет 82 донора (21,5%) были признаны инфицированными. В результате 164 пациента, ожидающие помощи, ее не получили так как при наличии положительных или сомнительных результатов по контрольным методам данный материал не использовался в хирургической практике и был уничтожен.
Несоответствие может быть объяснено тем, что согласно инструкции фирмы образцы крови для экспресс теста должны быть протестированы сразу же после взятия у живого донора или «жестких» условиях хранения при температуре 2-8°С в течении 72 часов после забора. Все случаи несовпадения приходятся на летние месяцы.
Выводы
1. Для исключения инфицированности реципиентов существующих экспресс-методов, предназначенных для исследования крови живого донора, не достаточно т.к. в 21,5% случаев не могут быть применены для «трупной крови» из-за нарушения температурных требований протоколов исследования фирмы.
Список литературы:
1. Sprung C.L. et all. The ethics study group end of life decisions in European intensive care units – the ethics study, JAVF, 2003, Vol.290. P.790-797. (in ES)
2. Suleimenov M.S. et all. «International experience in the cornea banks keratoplasty», — Almaty, — 2013, P.136-139. (in Kazach.)
3. Trzcinska–Dabrowska Z.: Keratoplastyka wspolczesna. Medycyna 2000, 15–17, — 1991.
4. Казённов А.Н. Автореферат на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. – Оренбург, — 2009.
5. Vylengala A., Dontsov A., Yurevich A., Bilinska B Role of «eye banks» in the development of keratoplastics. — 2013.
6. Ботабекова Т.К., Сулейменов М.С. . Исергепова Б.И., Есенжан Г.А, Сабырбаев Н.Б. Трансплантация роговицы в Казахстане- исторические этапыю. Инновационные технологии в повседневной офтальмологической практике. Материалы офтальмологического конгресса с международным участием, приуроченного к 80-летию Казахского НИИ глазных болезней. – Алматы, -2013.
7. Сулейменов М.С., Даулетбеков Д.Л., Махамбетов Д.Ж., Исергепова Б.И., Масимгазиев А.С. Международный опыт работы банков роговицы в системе кератопластики. Инновационные технологии в повседневной офтальмологической практике. Материалы офтальмологического конгресса с международным участием, приуроченного к 80-летию Казахского НИИ глазных болезней. — Алматы, — 2013.
8. Агентство РК по делам статистики. – 2011.
9. Sprung C.L. et all. The ethics study group end of life decisions in European intensive care units – the ethics study //JAVF.-2003.-Vol.290.-P.790-797.
References
1. Sprung C.L. et all. The ethics study group end of life decisions in European intensive care units – the ethics study, JAVF, 2003, Vol.290. P.790-797. (in ES)
2. Suleimenov M.S. et all. «International experience in the cornea banks keratoplasty», — Almaty, — 2013, P.136-139 (in Kazach.)
3. Trzcinska–Dabrowska Z.: Keratoplastyka wspolczesna. Medycyna 2000; 15–17, 1991.
4. Kazonnov A.N. Avtoreferat na soiskaniye uchenoy stepeni kandidata meditsinskikh nauk . – Orenburg, — 2009.
5. Vylengala A., Dontsov A., Yurevich A., Bilinska B Role of «eye banks» in the development of keratoplastics. — 2013.
6. Botabekova T.K. , Suleymenov M.S. , Isergepova B.I. , Yesenzhan G.A, Sabyrbayev N.B. Transplantatsiya rogovitsy v Kazakhstane- istoricheskiye etapyyu . Innovatsionnyye tekhnologii v povsednevnoy oftal’mologicheskoy praktike . Materialy oftal’mologicheskogo kongressa s mezhdunarodnym uchastiyem , priurochennogo k 80 — letiyu Kazakhskogo NII glaznykh bolezney . — Almaty, — 2013.
7. Suleymenov M.S. , Dauletbekov D.L. , Makhambetov D.ZH. , Isergepova B.I. , Masimgaziyev A.S. Mezhdunarodnyy opyt raboty bankov rogovitsy v sisteme keratoplastiki . Innovatsionnyye tekhnologii v povsednevnoy oftal’mologicheskoy praktike . Materialy oftal’mologicheskogo kongressa s mezhdunarodnym uchastiyem , priurochennogo k 80 — letiyu Kazakhskogo NII glaznykh bolezney . — Almaty — 2013.
8. Agentstvo RK po delam statistiki . — 2011.9. Sprung C.L. et all. The ethics study group end of life decisions in European intensive care units – the ethics study. JAVF.-2003.-Vol.290.-P.790-797.
ТҮЙІНДЕМЕ
ҚАСАНҚАБЫҚ АУЫСТЫРУ ҮШІН ДОНОР ҚАНЫНДАҒЫ ИММУНОХРОМАТОРГРАФИЯЛЫҚ ЭКПРЕСС- ТЕСТТІ ҚОЛДАНУ ТӘЖІРИБЕСІ
А.С. Масимгазиев, О.Г. Ульданов
Қазақ көз аурулары ғылыми-зерттеу институты
С. Д. Асфендияров атындағы Қазақ Ұлттық Медициналық Университеті
Қазақстан, Алматы
Мақалада донорлық қасанқабық қауіпсіздігін бағалау сұрақтары қарастырылады. Қасанқабықты алмастыруға арналған донор қанын иммунохроматографикалық экпресс- тестімен және ИФА, ПЦР әдістерімен қарсы денелерді анықтауда алынған салыстырмалы талдау жасалған.
Түйін сөздер: экспресс-тест, қасанқабық ауыстыру.
Summary
EXPERIENCE OF THE USE IMMUNOCHOMOTOGRACPY EXPRESSTEST IN BLOOD OF DONORS FOR TRANSPLANTATION OF CORNEA
A.S. Masimgaziev, O.G. Uldanov
Kazakh research institute of eye illnesses
Kazakh National medical university of the name S. D. Аsphendiarov
Kazakhstan, Аlmaty
The article examines the safety assessment of the donor cornea. A comparative analysis of the data detection of antibodies by immunochromatographic rapid test and by ELISA, PCR in blood donors for corneal transplantation.
Keywords: express-test, transplantation of cornea.
Отправить рукопись